几丁聚糖对中华绒螯蟹的免疫调控作用开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

一、 立论依据

中华绒螯蟹(eriocheir sinensis)俗称河蟹，在动物分类学上属于节肢动物门、甲壳纲、十足目、方蟹科、绒螯蟹属，广泛分布于我国长江、辽河和瓯江等水域，具有生长快，肉质细嫩，味道鲜美，经济价值高等特点^[1]。我国中华绒螯蟹的人工养殖业从20世纪80年代起步，养殖规模不断扩大，养殖产量逐年攀升。2006年，全国中华绒螯蟹的养殖产量超过50万吨，产值达300多亿元，已成为我国特优水产养殖主要品种业之一^[2]。但是，随着我国水产养殖规模的不断扩大，养殖品种的逐渐增多，养殖方式向高密度集约化演变，养殖环境的恶化等，细菌性、病毒性和寄生虫疾病(如颤抖病、腹水病、黑鳃病、烂肢病)流行，并且一旦这些疾病发生，极易以水生环境为媒介发生大规模的传播和感染，引起水产动物大量死亡，严重地影响中华绒螯蟹的养殖生产，给国家和养殖者造成了巨大的经济损失^[3]。有些严重危害中华绒螯蟹的传染性疾病，目前尚无有效的防治对策，蟹病防治已成为当务之急^[4]。

目前在中华绒螯蟹病害防治过程中，主要是大量使用抗菌素及一些化学药物。虽然对有关疾病有一定疗效，但存在着耐药性、毒副作用、大蟹体自身免疫力下降以及药物残留对人类健康造成诸多影响等^[5]。另外国内针对多次使用会产生耐药性菌株和塘泥污染危害的此类化学药物的使用，作了严格的限制^[6]。目前尚无有效的方法彻底治疗河蟹的病毒病。因此，寻求高效、环保、低毒副作用的药物，如通过免疫增强剂来启动和调节中华绒螯蟹的非特异性免疫，有效提高蟹类本身的抗病能力，已成为中华绒螯蟹病害免疫防治研究领域中的热点课题，越来越受到人们的关注。

2. 研究的基本内容和问题

1. 项目研究的目标、内容和拟解决的关键问题

⑴ 研究目标

采用在饲料中添加几丁聚糖的方式对中华绒螯蟹进行免疫刺激，较系统地研究其对中华绒螯蟹细胞免疫、体液免疫机制及抗病力的影响，进一步明确几丁聚糖的作用机制和影响因素，为几丁聚糖在养殖过程中增强中华绒螯蟹的免疫功能提供引导和方向，为中华绒螯蟹的病害防治提供科学的理论依据。

3. 研究的方法与方案

(1) 研究方法

① 试验河蟹：试验鱼取自中国水产科学研究院淡水渔业研究中心宜兴基地自繁的河蟹，选择无病无伤、活力强的个体作为试验个体。试验前在室内水泥池网箱［水温(281)℃，ph7.40.2］中暂养3d，自然光周期。暂养期间使用氧气泵连续充气，每天16:00投喂沉水性饲料(粗蛋白质含量为 29.0%、粗脂肪含量为8.0% )1次，投喂量为8-10g。

② 试验设计与分组：首先配制基础饲料，标记为0#饲料然后在每千克基础饲料中分别添加 10、20、30 和 40 ml的几丁聚糖溶液，另配制成4种试验饲料，分别用1#、2#、3#和4#表示，将各饲料使用饲料制粒机制成颗粒，阴凉处风干，－20℃保存备用。随后将螃蟹随机分为5组，每组3个重复，每个重复20只。5组试验螃蟹分别投喂0#(对照)、1#、2#、3#、4#试验饲料。饲养25d后，对其进行抗副溶血孤菌感染的攻读试验。

4. 研究创新点

首次单独进行几丁聚糖对中华绒螯蟹的免疫调控作用的研究。

4.项目研究计划及预期进展

⑴ 查阅相关文献，了解中华绒螯蟹的免疫机制，了解几丁聚糖的功能及作用机理。⑵ 配置含有不同浓度的几丁聚糖的试验饲料，前往淡水渔业研究中心宜兴基地进行采样 。⑶ 对试验螃蟹进行饲养管理，并对螃蟹进行血液的抽取及器官组织进行解剖分离。

5. 研究计划与进展

1. 与本项目有关的研究工作积累和已有的研究工作成绩

⑴ 申请者指导老师所在的实验室多年从事水产免疫和内分泌调控相关的工作，该研究与江苏红膏大闸蟹有限公司合作开展，该公司在中华绒螯蟹养殖上具有丰富的就是技术体系和成熟的养殖平台、饲料加工生产线，为本实验的开展提供了充足的实验材料和平台支撑，保障了实验的正常开展。