胱氨酸蛋白酶抑制剂C检测试剂盒的研制（免疫比浊法）开题报告

（1）免疫比浊法是 mALB 测定的常用方法，其理论基础是抗原、抗体在特殊缓冲液中能迅速形成抗原 - 抗体复合物，成为均匀分散于反应体系中的颗粒，这些颗粒具有光学特性，可使反应体系在浊度仪下出现度数，如果在反应体系中加入过量的抗体，随抗原量增加形成的复合物也会增加，反应体系的浊度亦随之增加。免疫比浊法根据浊度仪检测的反应体系是透射光还是散射光而分为免疫透射浊度法和散射浊度法。其中免疫透射浊度法测定透射光，依据的是朗伯 - 比尔定律；而免疫散射浊度法测定散射光，依据的是雷莱定律。免疫透射比浊法具有仪器构造简单、检测迅速、结果可靠、易实现自动化等优点，可整合在生化分析仪上，目前国内外生产厂商生产的生化分析仪都有免疫透射比浊功能，方法易于普及；而免疫散射 比浊法需要特殊的免疫散射比浊仪，很难整合在全自动生化分析仪上，目前国内临床检验工作中主要在既时检验（point of care testing， POCT）中使用。

（2）测定尿微量白蛋白最理想的方法是留取24 小 时标本，但因留取困难，在实际应用上受到限制。随机尿测定是目前最常用，最易行的方法。但应同时测定肌酐，因每日肌酐排除量相对恒定可避免尿量变化对结果的影响。尿微量白蛋白测定是一种灵敏、简便、快速的测定方法，易于在常规实验室中广泛应用，对早期肾损害的诊断远远优于常规定性或半定量试验。

（3）免疫透射比浊法仪器投资成本低、不需要另配专用的特种蛋白仪、试剂开启后稳定成本低、校准周期较长、患者的费用低，可与生化样本合并，可降低采血成本、测试速度快、结果稳定、线性范围广、重复性好。免疫散射比浊法须用特制的特种蛋白仪、试剂成本高 测试速度慢。两种方法的相关性：结果显著相关、一致性极强、重复性较好

（4）正常人肾小球基底膜具有3-4mm的微孔,并带有一负电病荷层,因而血液中中等分子及大分子蛋白质负电荷离子不易通过。血浆中含量最高的蛋白质是白蛋白,其分子量大,不容易通过肾小球 基底膜的微孔屏障,白蛋白的I P为4.7,在p H 7.4的血浆环境下带有大量负电荷而不易通 过肾小球基底膜的电荷屏障。因 此,正常时白蛋白不易通过肾小球滤过,并被肾小管几乎全部吸收。如果患者一旦出现肾小球人球毛细血管压升高,其基底膜滤过微孔直径增大,电荷屏障相排斥的作用 降低,肾小管血浆滤过孔径增大，重吸收能力下降,电荷屏障作用减小,肾小管重吸收能力降低加之血浆中小分子量蛋白质增多等因素,尿液中残存蛋白排出量就会增多从而出现微量甚至临床白蛋白尿。

微量白蛋白尿与高血压、视网膜病变呈正相关性,因而把尿微量白蛋白检查作为新发糖尿病患者的诊治的常规监测指标。尿微量白蛋白是评估肾脏受损程度:当发现尿微量白蛋白在20一2 00 m g L/范围内,尿常规尿蛋白的显示为阴性(-)或( -),就属于微量白蛋白尿,这个时候说明肾脏已经损伤,如果患者能够及时就医经过规范的修复肾单位 ,纤维化逆转治疗,还或许能彻底修复肾小球,尿检微量白蛋白变成阴性而当尿中微量白蛋白超过2 0 0 m g /L 时,尿常规测试尿蛋 白阳 性( )( ),就应该警惕了,此时说明体内大量白蛋白从肾小球滤膜漏出,可能会引起低蛋白血症,肾病不可逆期的发展只是一步之遥,如果不及时进行医治,就会进人尿毒症期。

参考文献： （1）《尿微量白蛋白检测试剂盒性能验证》 冯洋

（2）《微量白蛋白检测在临床中的应用》 李欣

（3）《浅谈免疫比浊法技术优势》 孙立芳 赵静

（4）《尿微量白蛋白测定在糖尿病中的临床应用》姜翠英