链霉素抗性选育ε-聚赖氨酸高产菌开题报告

1. 研究目的与意义

1.研究背景

ε-聚赖氨酸(ε-pl)由25 ~ 35个l-赖氨酸单体通过a-羧基和ε-氨基脱水缩合而成，通常由链霉菌属产生经分离提取精制而获得，分子量一般为3200 ~ 4500 u，在食品、农业、制药和化妆品行业正得到广泛的研究，又因其具有热稳定性、抗菌性、生物降解性以及安全无毒等优点，ε-pl目前主要用作一种天然食品防腐剂应用于淀粉、肉以及果蔬等制品的防腐与保鲜。同时，有非常广泛的抑菌谱，包括酵母菌、霉菌、革兰氏阳性和阴性细菌等。早在20世纪80年代，日本首次批准ε-pl作为食品防腐剂，随后被引入美国、韩国和其他国家。2014年，ε-pl及其盐酸盐也被中国国家卫生和计生委批准为食品防腐剂。

近年来，一种被称之为核糖体工程的技术日趋热门，该技术将传统的物理、化学诱变与抗生素抗性筛选相结合，能够通过改变微生物内部的代谢通路来导致ε-pl合成能力的变化，促成菌种ε-pl产量的提高。其中，链霉素、庆大霉素等常见的抗生素，在ε-pl生产菌的育种方面得到了广泛的运用，并收效明显。

2. 研究内容和预期目标

1.研究内容

本实验以ε-聚赖氨酸产生菌白色链霉菌为出发菌株,利用抗自身代谢物理性筛选法作为诱变育种的辅助筛选手段结合传统的紫外诱变，最终选育出了一株遗传稳定的高产菌株,且整个选育进程的工作效率与常规的诱变随机筛选法相比有了极大的提高。

1）利用紫外诱变结合抗生素抗性诱变方法，对白色链霉菌进行诱变选育，选用链霉素作为其抗性物质。

3. 研究的方法与步骤

1.研究方法

（1）菌体培养方法：

① 平板/斜面培养

4. 参考文献

[1] 余明洁,田丰伟,范大明等.高产ε-聚赖氨酸白色链霉菌的复合诱变选育研究[j].食品工业科技，2008，no.207(07):99-101 104.

[2] 李海燕,夏治停,关丽杰.链霉素抗性突变理性筛选链霉素高产菌株[j].科学技术与工程，2015，15(01):174-177.

[3] 刘永娟.基于核糖体工程技术的ε-聚赖氨酸高产菌株选育及高产机制解析[d].江南大学，2020.

5. 计划与进度安排

（1）2024-2024-1学期17-20周~2022-2023-2学期第1-3周（2024-12-27~2023-3-12）：查阅资料撰写开题报告，外文论文翻译；培养基制备与菌种的活化；

（2）第4周~第6周（3.13~4.2）：确定链霉素最低抑制浓度，确定最佳添加条件；

（3）第7周~第12周（4.3~5.14）：摇瓶发酵验证，并进行相关培养基条件优化；