1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
猪传染性胃肠炎(tge)是猪的一种具有高度接触传染性的病毒性疾病。
主要由传染性胃肠炎病毒(tgev)引起。
临床特征为严重腹泻、呕吐和脱水。
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2. 研究的基本内容和问题
1. 猪传染性胃肠炎病毒的传代与纯化;2. 猪传染性胃肠炎病毒S基因的鉴定、克隆与序列分析,比较其与其他毒株的不同;3. 猪传染性胃肠炎病毒的致病性实验,研究该毒株弱化后的生物学特性。
3. 研究的方法与方案
研究方案:1病毒的培养将处理好的病毒液接种于生长良好,长成单层的st细胞瓶中。
盲传多代,收获细胞培养液,-20℃保存。
2 病毒的纯化利用病毒蚀斑技术单层法,将病毒进行3次挑斑纯化,再盲传多代,并收取病毒液,-70℃保存。
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4. 研究创新点
本研究将对适应细胞后的TGEV在ST细胞上传代200 代,通过挑斑进行病毒的纯化,并对S基因进行扩增、克隆,序列分析及比较,最后进行动物致病性实验,以研究该毒株弱化后的生物学特性,为弱毒株疫苗与基因工程疫苗的制备奠定一定的基础。
5. 研究计划与进展
2015年9月 搜集相关资料,设计实验方案,进行准备。
2015年10月 病毒的分离及病毒的纯化及病毒细胞半数感染量(TCID50)的测定2015年11月 RT-PCR病毒基因片段的扩增与鉴定2015年12月 病毒的攻毒实验及结果分析2016年1月-2015年6月 撰写毕业论文
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