枯草芽孢杆菌作为佐剂增强灭活禽流感病毒免疫效果的研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

枯草芽孢杆菌（bacillussubtilis）是一类重要的生物防治资源，在防治植物的病害中发挥了重要的作用。该菌的芽孢具有耐热、抗干燥、便于运输和使用等优点，在西方国家芽孢杆菌已被开始应用于人的功能性食品和动物饲料添加剂。近年来的很多研究表明枯草芽孢杆菌在防御动物疾病上有重要的作用，主要体现在拮抗病原菌、促进机体免疫反应和作为有效的疫苗载体系统或佐剂以促进黏膜疫苗的发展等方面。枯草芽孢杆菌在提高动物机体的免疫能力及相关机制一直是研究热点之一，枯草芽孢杆菌在体液、细胞免疫和黏膜免疫上的特性使其成为当今制备黏膜免疫疫苗的一种理想的疫苗载体和良好的增强疫苗免疫效果的佐剂。本课题通过研究枯草芽孢杆菌对禽流感灭活病毒h9n2的免疫效果，为枯草芽孢杆菌用作黏膜疫苗的有效载体或免疫佐剂等应用研究和在防御动物疾病中的深入研究提供更有力的理论参考。

参考文献：

[1]叶小兰，杨倩．枯草芽孢杆菌在防御动物疾病中的研究进展[j]．中国兽医科学，2011，41（09）：986-987．

2. 研究的基本内容和问题

应用枯草芽孢杆菌配合禽流感H9N2灭活病毒进行家禽鼻腔免疫，从局部免疫和全身免疫两个方面，通过检测血清IgG、呼吸道和消化道液中的IgA，制备肠道、器官和鼻腔的组织切片，从而观察比较该菌对禽流感灭活病毒H9N2的免疫增强作用，为枯草芽孢杆菌对提高动物机体免疫力的研究和广泛应用奠定基础。

3. 研究的方法与方案

1.研究方法

以spf鸡为实验动物建立动物模型，共分成四组（30只/组）。组1-组4分别免疫添加枯草芽孢杆菌的禽流感灭活病毒h9n2、禽流感灭活病毒h9n2、枯草芽孢杆菌（wb800株）、pbs，于相应日龄采样后测iga和igg，制备组织切片。攻毒后测病毒滴度。

2.技术路线

4. 研究创新点

枯草芽孢杆菌是重要的生物防治资源，在防治植物的病害中发挥了重要的作用，而其对动物的应用研究也才处于起步阶段。本课题为枯草芽孢杆菌对提高动物机体免疫力的研究和广泛应用奠定基础。

5. 研究计划与进展

1.研究计划

⑴2015.09.14-2015.10.05鸡胚的孵化

⑵2015.10.07称重，首免