日本血吸虫凝溶胶蛋白的克隆与表达开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

全世界约有2亿人感染血吸虫，有近6.5亿人受到血吸虫感染的威胁。

在我国主要流行的是日本血吸虫病 [1-2]。

筛选高效的疫苗候选分子、更加特异的诊断抗原以及新的药物靶点成为血吸虫病防治的需求，是控制血吸虫病流行, 消除其对人类健康危害的关键[3-4]。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标: 克隆和表达日本血吸虫排泄分泌蛋白gelsolin，对其进行生物信息学分析，为深入研究该蛋白的生物学功能，以及寻找新的抗血吸虫病疫苗候选分子和药物靶标奠定基础。

研究内容：1.日本血吸虫42d虫体的收集2.日本血吸虫42d cDNA模板的制备3.日本血吸虫gelsolin基因的克隆及生物信息学分析5.重组质粒pET-28a( )-gelsolin的构建与鉴定6.重组蛋白gelsolin的原核表达拟解决的关键问题：1.日本血吸虫gelsolin基因的克隆2.日本血吸虫gelsolin蛋白的表达

3. 研究的方法与方案

研究方法：1.反转录：rna提取后反转录合成cdna。

2.pcr扩增：运用pcr技术克隆日本血吸虫gelsolin基因。

3.琼脂糖凝胶电泳：鉴定pcr反应产物。

4. 研究创新点

寻找血吸虫病候选疫苗的研究和新治疗药物靶标的筛选等研究是近几年的热点。

国内外在血吸虫病疫苗方面已经取得了一定的进展，也获得了一些候选疫苗，并进入了试验研究阶段。

在血吸虫排泄分泌蛋白组研究方面，曼氏血吸虫在多个时期虫体方面已有报道，日本血吸虫仅在42天成虫方面有相关报道。

5. 研究计划与进展

项目研究计划:1-8周（2015.08.31-10.18）：收集日本血吸虫42d虫体，模板的制备。

9-13周（2015.10.19-11.22）：gelsolin基因的克隆与生物信息学分析。

14-17周（2015.11.23-12.27）：gelsolin基因的表达。