玉米赤霉烯酮对胚胎发育的毒性损伤开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

霉菌毒素是由真菌产生的有毒的次级代谢产物，在世界范围内广泛侵染粮食作物和饲料，对人类健康和动物的生产机能造成严重的危害。霉菌毒素中毒对畜牧业的发展造成严重威胁，导致巨大经济损失。其中，玉米赤霉烯酮（zea）是猪饲料中存在最为广泛，危害最为严重的霉菌毒素之一^[1]。zea广泛存在于食品和饲料中，可导致对生物体生殖系统和胚胎发育的不可逆毒性损害，对动物繁殖性能影响严重。因此，本试验的目的是以猪孤雌激活胚胎为模型研究zea对早期胚胎发育的毒性损伤及原因，从而在生产中做出有效的预防。

玉米赤霉烯酮（zea），又称为f-2毒素，1962年stob等首次从发霉的玉米中分离得到，是由镰刀菌属的真菌，包括禾谷镰刀菌、三线镰刀菌、黄色镰孢、木贼镰孢和尖孢镰刀菌等菌种产生的一种霉菌毒素^[2]。elsharkawy和abulhajj的研究表明zea的毒性可能与其内酯环和c-4羧基有关^[3]。zea不溶于水且具有热稳定性，这在很大程度上增加了脱毒的难度。zea广泛存在于水分含量大于22%的玉米、大麦、燕麦、小麦、大米和高粱中^[4]。

zea通过雌激素受体介导、破坏血睾屏障、上调氧化应激、诱导细胞凋亡等多种机制产生直接和间接的毒性作用^[5-8]。zea具有肝毒性和肾毒性，能引发肝和肾组织病变，造成功能损伤^[9]；zea具有免疫毒性，能影响多个免疫参数，降低免疫球蛋白水平^[10]；zea具有遗传毒性和细胞毒性，可导致dna断裂，造成dna结构损伤，引起dna复制受阻，抑制蛋白质的合成并干扰细胞分裂周期，从而抑制细胞增殖^[11]。此外，zea对动物胚胎发育具有更显着的毒性效应，可导致动物异常繁殖甚至死亡^[12]。zea主要通过胎盘传播干扰动物胚胎的发育，影响妊娠率和后代卵泡完整性。zea可以在妊娠期间通过胎盘转移至胎儿^[13]。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：

为研究zea对胚胎发育的毒性损伤，利用孤雌激活胚胎，首先通过添加不同浓度zea处理早期胚胎，对以研究其对早期胚胎发育的毒性作用机制，为今后开发解毒提供理论科学依据。

研究内容:

3. 研究的方法与方案

研究方法：

试验设计：单因素多因子实验设计，两个水平（5μm、10μm）以及对照组，每个处理三个重复，之后利用免疫荧光染色，通过荧光强度分析检测孤雌激活胚胎内氧化应激状态和自噬水平。

试验方法与样品采集：

4. 研究创新点

目前，关于ZEA对胚胎的影响有一些报道，但都集中在附植后的发育阶段，ZEA对早期胚胎的毒性及其机制仍不清楚，后续研究旨在总结前人成果，并获得关于ZEA对早期胚胎发育的毒性作用更加全面和深入的认识，揭示其毒性机制，为进一步研究ZEA提供理论基础。

5. 研究计划与进展

2018.11-2018.12 查阅文献资料、熟悉实验操作

2018.12-2019.2 实验设计、实验材料的准备

2019.2-2019.4 各项指标的测定