猪肠道沙门氏菌噬菌体分离鉴定及其生物学特性研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

仔猪因多项生理功能尚未完善且调节机能不健全，常在复杂不稳定的环境中遭受各类病害威胁，其中腹泻是初生仔猪死亡的主要原因^[1]，更是养猪生产中的棘手问题，而沙门氏菌是引起仔猪腹泻的重要病原之一。国内外学者对猪场的沙门氏菌调查显示，猪群粪便中沙门氏菌的分离率达 4%-17%^[2-4]，，而腹泻粪便样品中检出率达 18%-35%^[5,6]。并且调查发现断奶阶段粪样中沙门氏菌的分离率显著高于生长或哺乳阶段，沙门氏菌感染可加重腹泻的严重程度，增加腹泻仔猪的死亡率，给我国养猪业带来巨大经济损失。

考虑到仔猪腹泻的巨大危害，生产实践上常用在饲料中添加抗生素的方法防治断奶仔猪腹泻疾病的发生，促进仔猪生长发育，提高经济效益。然而，抗生素长期广泛的使用，出现了抗生素耐药性和畜产品药物残留问题，抗生素的滥用使越来越多的致病菌产生抗性，抗生素的效果越来越不明显，致病菌抗生素耐药性问题日趋严重。近年来，噬菌体作为抗生素替代品防治细菌性疾病的研究工作得到广泛关注，gebru (2010)^[7]和yan (2012)^[8]试验结果均表示，在饲料中添加噬菌体，对生长猪的促生长效果与添加抗生素的效果无显著差异，且均显著高于对照组，提示着噬菌体可作为抗生素的替代品使用。而wall^[9]等研究噬菌体对猪沙门菌的控制作用试验表示对3周龄~4周龄的仔猪注射合适剂量的噬菌体鸡尾酒后，仔猪回、盲肠处沙门氏菌基本全部消失，显示了噬菌体与抗生素相当甚至更甚的杀菌作用。 kim (2014)^[10]的试验结果则显示饲料中添加混合噬菌体对生长猪的促生长效果要高于添加益生菌的效果。自上世纪噬菌体制剂出现及实验成功后，发展前景大好。而以上这些结果均提示噬菌体作为新的抗菌制剂在细菌性感染的治疗方面具有抗生素无法比拟的优势以及其替代抗生素的巨大前景。

目前，国内外多将噬菌体应用于食源性病原菌控制、病原感染动物治疗、食品添加等方面而很少从营养学角度发掘其改善肠道内环境及肠道健康的特点并应用。因此，本项目将针对仔猪沙门氏菌噬菌体进行探究，研究拟分离鉴定猪霍乱沙门氏菌噬菌体，并研究其生物学特性和裂解效力，为畜牧业防治猪霍乱沙门氏菌感染、研究噬菌体对抗生素的替代作用提供新的思路和研究基础。

2. 研究的基本内容和问题

1.研究的目标、内容和拟解决的关键问题

1.1.研究目标：

（1）分离猪肠道沙门氏菌噬菌体

3. 研究的方法与方案

1.研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析

1.1.拟采取的研究方法

本实验的研究对象是健康仔猪，从南京一猪场采集生长状态相同的健康仔猪进行其肠道粘膜及食糜粪便的采集，采集后保存至实验室以备接下来的处理

4. 研究创新点

1）利用噬菌体从本源改善生物机体健康为畜牧业尤其是猪生产中预防防护仔猪腹泻提高仔猪存活率、提高生产力提供新思路

2）噬菌体比起抗生素优势越来越明显，但对噬菌体对抗生素的替代效果研究较少或应用机制不完善，项目从该方向出发提供新思路。

5. 研究计划与进展

1）2018年11月初到11月下旬确立项目研究方向及实验内容。

预期:和导师商议确定研究课题并制定计划。

2）2018年10月到2019年4月根据研究计划进行样品采集及实验。