1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
中药菊花系菊科植物菊花( chrysanthemum morifoliumramat)的干燥头状花序,具有散风清热,平肝明目,清热解毒的功效。早在《神农本草经》就记载菊花时云:久服利血气,轻身耐志延年。后世医药学家对菊花逐渐有了更深的认识,如《名医别录》记载菊花可以安肠胃,利五脉,调四肢。《本草拾遗》记载菊花作枕明目。是我国常用的大宗型药材,有很高的药用和经济价值。
土壤盐碱化和次生盐碱化问题在世界范围内广泛存在,全球盐碱土地的总面积高达10亿hm2,约占世界陆地面积的7.6%。我国也有大面积的盐碱地面积为0.27亿hm2,约占耕地面积的10%[1]。沿海和北方地区的盐渍化土壤对其生长发育及品质和药用价值有不良影响,成为其应用的限制因子。菊花耐盐性评价对菊花优良种质资源的筛选、药用菊花质量安全、稳定、有效、可控;扩大种植提高产量以及菊花耐盐生理的研究都具有极其重要的意义[2]。
国内外对于菊花耐盐性有一定的研究,对菊花耐盐的机制及其遗传性,菊花的耐盐筛选,转基因菊的耐盐,苗期菊花的耐盐,杂交品种的耐盐,等均有研究。
2. 研究的基本内容和问题
研究的目标
1, 通过本课题研究比较七种药用菊花在不同盐浓度及不同浓度梯度人工海水下的品质及耐盐性;
2, 通过本课题研究探索对菊花优良种质资源的筛选的方法;
3. 研究的方法与方案
实验方案
选取待评价的七种药用菊花,水培处理,用清水冲后,先测量各处理的株高、鲜重。用Hoagland营养液缓苗3d,然后将植株根系分别浸入盛有盐梯度为CK、1/10、3/10、2/5人工海水和60mmol、126mmol、181mmol、241mmol NaCl的中转箱内,每箱内每种菊花5棵。试验拟设3次重复。20天后测定各处理株高、鲜重、叶片中SOD、POD、CAT活性、MDA、可溶性糖、可溶性蛋白、脯氨酸、叶绿素含量、电导率、水分饱和亏。
10月中旬测定待评价品种光合色素含量。11月初观察待评价植株花器官性状:花大小、干鲜重、折干率。12月初测定各待评价品种有效成分含量。
叶绿素含量采用乙醇丙酮碾磨提取比色法测定;丙二醛含量采用硫代巴比妥酸比色法测定或TBA法测定叶片丙二醛含量;游离脯氨酸含量采用磺基水杨酸碾磨提取比色法测定或茚三酮法测定叶片脯氨酸含量;细胞质膜透性采用相对电导率测定;可溶性糖含量采用蒽酮比色法测定;可溶性蛋白采用考马斯亮蓝G-250 法测定;采用雷氏盐分光光度法测定叶片甜菜碱含量。分光光度法测定茎中黄酮含量,HPLC测定绿原酸含量。
可行性分析
1, 菊花为常见大宗型药材,品种繁多,实验材料易得;
2, 药用菊花在江苏盐碱土壤地区有一定的栽培历史,对于研究有益;
3, 实验采用水培法,占用空间少,实验可操作性强;
4, 实验通过对文献的搜集阅读,具有理论基础;
技术路线
查阅文献 |
选定待评价的七种药用菊花,洗净,测定株高鲜重 |
确定实验所需人工海水和NaCl的浓度梯度 CK、1/10、3/10、2/5及60mmol、126mmol、181mmol、241mmol |
水培处理 |
测定各处理株高、鲜重、叶片中SOD、POD、CAT活性、MDA、可溶性糖、可溶性蛋白、脯氨酸、叶绿素含量、电导率、水分饱和亏。 |
测定光合和光合色素含量 |
测定植株花器官性状:花大小、干鲜重、折干率 |
测定各待评价品种有效成分含量 |
整理分析数据 |
4. 研究创新点
对于菊花耐盐性的研究,多为观赏栽培类菊花,对于药用菊花耐盐性的研究较少。本实验用七种不同药用菊花进行实验,用不同浓度的人工海水和NaCl分别处理七种药用菊花,人工海水是接近于海水的离子组成、渗透压和pH而配制的,可以在一定程度上模仿沿海盐碱地的条件,有利于实验的研究进行。
5. 研究计划与进展
2013年5月选取待评价品种,水培处理,拟设盐梯度:ck、1/10、3/10、2/5人工海水、60mmol、126mmol、181mmol、241mmol的nacl。试验拟设3次重复。20天后后测定各处理株高、鲜重、叶片中sod、pod、cat活性、mda、可溶性糖、可溶性蛋白、脯氨酸、叶绿素含量、电导率、水分饱和亏。
2013年10月中旬测定待评价品种光合和光合色素含量。
2013年11月初观察待评价植株花器官性状:花大小、干鲜重、折干率。
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