1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
dnj是一种多羟基哌啶生物碱,具有降血糖、抗病毒、抗肿瘤转移等作用,可用于治疗糖尿病、肥胖症、病毒感染等疾病,且安全性好,不损伤肝肾健康,无胃肠道副作用,具有很高的药用价值和食用价值。近年来,dnj在研究领域越来越受到国内外学者的青睐,作为天然dnj重要来源的桑叶,得到较广泛应用。日本等国已允许以桑叶为原料的食品作为降血糖的功能性食品在市场上销售,如桑叶面、桑叶饼干、桑茶、桑叶汁饮料等产品,我国也开发出桑叶系列保健品种及功能性饮料,如桑叶保健酒、桑叶口服液、桑叶糕点等。随着人们消费质量和消费水平的不断提高,保健意识的逐步增强,dnj作为一种高药用价值和食用价值的物质,在功能食品、医药中应用范围将越来越广,将为人类的健康事业做出重要的贡献。
风信子,野拓草,鸭跖草,沙参属植物,爵床科植物等几种植物体内也发现含有少量的dnj,但含量均远不及桑叶。然而,虽然相比于其他植物和微生物,dnj在桑叶中含量较高,但其在桑叶中的含量依然无法满足人们的需求。由于天然来源的dnj含量甚低,后人对其合成也进行了大量研究。如:以l-山梨糖,d-葡萄糖为起始原料的化学合成法;以磷酸二羟丙酮,肌-环己六醇,d-甘露醇为起始原料的化学合成法;微生物转化法与化学合成法相结合等。但人工合成dnj又难以满足人们对纯天然的要求。
虽然目前dnj应用前景可观,但关于如何提高dnj在桑叶中的含量,国际上并没有相关研究,甚至关于桑树中dnj的确切来源也还没有定论。本实验拟通过对桑叶的不同加工处理,提高dnj在桑叶中的含量,为以dnj为有效成分的药物或保健食品的开发和广泛使用奠定基础。
2. 研究的基本内容和问题
研究内容及目标:对桑叶进行不同的切分度处理、不同糖浓度浸泡处理、不同糖浸泡时间处理、不同糖浸泡温度处理。拟通过单因素实验确定出最佳切分度,最佳糖浓度,最佳糖浸时间,最佳糖浸温度,进而确定最佳处理组合,确定桑叶最佳dnj富集条件。
拟解决的关键问题:
1、单因素实验要严格遵循控制变量法,除需研究的因素外,其他可能会对结果造成影响的因素要保证高度一致。
3. 研究的方法与方案
研究方法:
单因素实验,高效液相色谱法。
实验方法:
4. 研究创新点
国际上目前并无桑叶中DNJ富集的相关研究,因此我们设想:因为DNJ的合成前体是葡萄糖,所以我们用葡萄糖浸泡桑叶,研究桑叶切分度,葡萄糖浓度,糖浸时间,糖浸温度对其DNJ含量的影响。希望确定出最佳的浓度,最佳切分度,最佳糖浸时间,最佳糖浸温度,进而确定最佳处理组合,提高桑叶内的DNJ含量。希望通过本实验为DNJ的富集研究提供参考,为保健食品中功能性成分的富集工作提供依据。
5. 研究计划与进展
机械切分处理
选取叶片大小相近的桑叶,分成5份,每份100g,分别切分成2片,4片,8片,16片,以完整叶片为对照,切分后浸泡于20g/l的葡萄糖溶液中,静置2h,同时温度控制在30℃。上述处理后的样品,直接干燥至恒重,粉碎过60目筛,配制桑叶样品,取衍生化后的桑叶样品,进行rp-hplc检测,确定最佳切分度。
葡萄糖浸泡处理
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