AR156对南方根结线虫趋性分析实验开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

植物寄生线虫已成为植物的一类重要病原物, 线虫病害已成为农、林生产上的问题。据fao 保守估计, 全世界每年因线虫病害对粮食和纤维作物造成的损失大约占总损失的12%，对蔬菜、花生、烟草和某些果树造成的损失则超过2o%。目前国际上报道的根结线虫有80多种, 主要寄生在蔬菜、粮食作物、经济作物、果树、观赏植物及杂革等2000多种寄主上。

对于根结线虫的防治, 一直是使用化学杀线剂, 导致线虫抗药性增强, 虫口密度上升。在根结线虫所有天敌生物中, 研究最多的是食线虫菌物,其次是穿刺巴氏杆菌和根际细菌, 其余种类了解甚少。如becker等报道根际细菌(pseudomonas fluorescens和bacillus spp.)能显著降低根结指数。dickson e.t a.l 已经证明巴氏杆菌(pasteuria penetrans)对根结线虫的数量有抑制作用。而许多球形芽孢杆菌(b. sphaericus)和其它产孢的苏云金杆(b.thuringiensis subsp. brasiliensis) 及侧孢芽孢杆菌( b. laterosporus )对根结线虫(m. javanica )有一定的效果。

ar156根围促生细菌(pgpr)蜡质芽胞杆菌(bacillus cereus)ar156 是具有很高应用前景的生防菌剂,不仅能促进番茄、辣椒、黄瓜等作物的生长，还对番茄青枯病、黄瓜根结线虫病等土传病害具有很好的防效，此外还能通过同时激发系统获得抗性(sar)和诱导系统抗性(isr)两条信号途径来诱导番茄和拟南芥的抗病性。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：

探讨生防菌ar156对番茄南方根结线虫病生物防治机理，利用pluronic gel f127 胶系统，模拟土壤环境，探究蜡质芽孢杆菌ar156，植物以及根结线虫三者之间的互作，研究生防菌以及不同抗病突变体对线虫趋性及致病性的影响，尝试阐述其防治机理。为更好利用该生防菌株提供理论依据。

研究内容：

3. 研究的方法与方案

研究方法、技术路线、实验方案：

（1） ar156能够对根结线虫具有吸引的作用

将ar156用预冷的胶悬浮，灌注于无菌枪头中，室温凝固，备用。其中ar156菌液，ar156上清，lb，水，等处理，我们采用将处理液与46% 的胶等体积混合，室温凝固，即是混有各处理组分的23%的胶。将混有根结线虫二龄幼虫j2的pluronic gel 倒入培养皿中，线虫浓度100条/ml。与此同时，将预先做好的混有各处理组分的枪头放于培养皿中央，横放。将培养皿转移至室温，凝固。待凝固好后，放于28度培养箱，每隔两个小时拍照观察一次，看线虫是否能够趋向于枪头部位。本部分试验共设五个处理（ar156菌液，ar156菌体，ar156上清，lb，水）

4. 研究创新点

Pluronic gel F127 胶是一种无色透明的胶系统，可以用其模拟土壤环境，将液态胶与根结线虫混合不会对线虫的存活率以及趋性造成影响，并且有利于拍照观察线虫的趋性。

5. 研究计划与进展

2013.082013.09 菌株活化培养，根结线虫的准备

2013.102013.12 根结线虫的趋性试验

2014.01 数据分析及整理