新疆不同烟粉虱抗性种群中P450基因的表达分析开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

烟粉虱bemisia tabaci( gennadius)属于刺吸式昆虫，取食寄主植物的汁液，通过直接刺吸为害、传播植物病毒、引起植物生理紊乱、分泌蜜露诱发真菌病害给作物生产造成巨大的经济损失。

烟粉虱于1889年首先发现于希腊烟草上，分布于世界100多个国家，由于地理差异和寄主广泛等原因逐渐形成多个复合种，目前报道的至少有32个隐种，不同隐种的烟粉虱在寄主范围、传毒能力、共生菌组成以及抗药性等方面都存在显著差异，在所有隐种中，b隐种和q隐种烟粉虱入侵性最强，世界范围内分布最为广泛［1］。

烟粉虱在我国最早报道于1949年，暴发于20世纪90年代，当时b隐种烟粉虱主要存在于广东、山东、河北、天津和北京等地，给农业、园艺及观赏作物产业造成了严重的经济损失。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：通过荧光定量PCR技术检测了的烟粉虱的CYP6CX4,CYP4C64,CYP6CX1V1和CYP6DZ7四种细胞色素P450基因在吐鲁番，莎车，伊宁3个不同地区抗性种群的mRNA水平表达情况来明确细胞色素P450基因与烟粉虱对吡虫啉抗性的相关性。

内容:1. 烟粉虱RNA提取与cDNA合成2. 荧光定量PCR技术检测不同P450基因的mRNA表达程度拟解决的关键问题：荧光定量PCR技术的规范操作

3. 研究的方法与方案

研究方法：利用荧光定量pcr技术比较不同烟粉虱抗性种群中不同细胞色素p450基因表达量差异。

技术路线：提取rna→设计引物→定量pcr分析→明确烟粉虱对吡虫啉的抗性与4个p450基因的相关性实验方案：收集新疆吐鲁番，莎车，伊宁3个烟粉虱抗性种群成虫，进行rna提取，然后利用荧光定量pcr仪定量分析mrna表达量。

荧光定量pcr技术：采用abi 7500实时pcr系统，以sybr green为染料，进行基因扩増及数据分析。

4. 研究创新点

通过荧光定量PCR技术分析新疆烟粉虱对吡虫啉抗性相关的P450基因。

对于其抗性机智的阐明奠定了基础。

5. 研究计划与进展

研究计划：2017年7月20-21日在实验室实施利用荧光定量pcr技术检测4个p450基因的mrna表达程度2017年9月，用数据处理软件进行数据分析处理并且制表，观察结果并且记录。

2017年10月，完成数据分析，进行结果讨论与课题概述。

目前进展：已完成实验室荧光定量pcr技术的操作与数据记录。